Microscope inversé Nikon Diaphot 300

J'ai eu l'opportunité en mars 2016 d'un achat d'occasion d'un exemplaire de ce modèle de microscope inversé Nikon pour optiques en 160 de série CF. Il était dans un ensemble de 4 parties dont je n'utiliserai immédiatement que les 2 premières: 1) Le microscope inversé Nikon Diaphot 300 équipé du condenseur pour contraste hoffman, de 3 objectifs Hoffman 10x, 20x et 40x et d'une platine motorisée XY plus un moteur sur l'axe micrométrique Z. et 2) le système de controle de la motorisation 3 axes ITC MC 2000 avec manette de jeux ou sortie série. (a fonctionné temporairement mais est tombée en panne . un fusible était prévu pour 110V!? je l'ai confiée à un électronicien)
3) 3e partie: une camera vidéo qui  semble HS (en noir démontée sur la photo; j'ai enlevé les cables vidéo et alim) Je l'ai remplacée par un Nikon one au foyer des objectifs sur la sortie en monture C latérale du microscope. Il y a aussi possibilité de monter un projectif avec le raccord pour chambres Microflex. Ce système permet de mettre un projectif 0,5x  (à gauche) pour Miccam ou éventuellement un 2x ou 2,5x pour capteur APS  ou grand format (mais inutile dans le dernier cas car doublon avec la sortie photo intégrée) noter également sur cette image  le moteur pour l'axe Z, relié directement à l'axe du bouton de règlage micromètrique.
4) Enfin un ordinateur Siemens Nixdorf avec lecteur graveur  externe de CD et le  logiciel Trakcell de comptage automatisé de cellules. C'est obsolète!!! et sans caméra vidéo, ce n'est plus opérationnel. (il me faudrait retrouver une caméra compatible avec la carte d'acquisition vidéo de l'ordinateur ). Cette partie va rester dans un coin jusqu'à ce que je retrouve un usage à ce vieil ordinateur comme faire tourner de vieux logiciels... J'ai, en effet malgré tout, fait un démarrage avec un écran moderne et j'ai vu apparaitre un menu MSDOS 6.2 et une fenètre  Windows 3.11. Il tourne encore parfaitement semble t il et le logiciel est sur le disque dur!

Cette informatique signe un age fin XXe! Effectivement, ce modèle de microscope Nikon Diaphot 300 date des années 1990 à 2000 . Plus exactement, d'après le site de Brooke Clarke , il remplace le Diaphot TMD de 1980 vers 1990, et est remplacé dès 1997 par la gamme à l'infini CFI Diaphot eclipse TE de design externe très simillaire d'après microscopyu D'après l'historique ci contre tiré de la brochure Nikon du modèle Eclipse Ti-E vue après ces sites, le modèle Diaphot 300 est sorti exactement en 1990, et est mème remplacé un an plus tot en 1996. (image affichable 2 fois plus grande) Le mode d'emploi est disponible en ligne. Mais il est difficile de trouver la documentation d'époque pour ce modèle contemporain des débuts de la démocratisation  d'internet. Je n'ai pas vu de scan de brochure publicitaire... Un schéma de microscopyu  néanmoins montre le trajet optique sur le successeur immédiat de forme très similaire, l' Eclipse TE300, mais prévu pour les optiques CFI (et équipé CI sur le schéma) :

Ce modèle possède une sortie photo directement utilisable avec mes boitiers  Nikon et équipée d'un cadre amovible  permettant de voir aux oculaires le champ cadré avec un boitier 24x36. Voici une première image réalisée avec ce matériel en contraste d'Hoffman C'est une diatomée d'une préparation achetée sur Ebay, Aulacodiscus johnsonii, avec l'objectif  40x sur le capteur d'un Nikon D5000 (pratique par l'écran orientable pour visée en live view mais qu'il me faudra remplacer par un boitier moins bridé en usage sans objectif de la firme.) La préparation a été placée lamelle en bas pour que les objectifs soient utilisés  dans de bonnes conditions. Le contraste d'Hoffman donne du relief et un effet directionnel dans les zones floues, comme l'éclairage oblique. On peut ne pas apprécier le fond gris qui lui est associé. Il faut surtout éviter de trop le pousser car alors son effet directionnel produit des artefacts allongés désagréables. En tout cas, au vu de cette image, l'achat est satisfaisant!

J'ai commencé aussi à tester ce microscope avec des boites de cultures. C'est la fonction première d'un microscope inversé. Cela permet des observations impossibles autrement sur du vivant. Dans mon cas, pas de cultures de microorganismes pour l'instant, mais du plancton récolté et transféré dans ces flacons plastique à fond de qualité optique! (dimension de 2 lame : 52x76mm) Mais il y a alors une limite liée à la très faible distance de travail des objectifs forts de microscope: il n'est possible d'observer que ce qui est très proche du fond de la boite. Si on remonte avec un objectif faible pour visualiser le volume supérieur, il y a risque de toucher avec l'objectif fort à la rotation de la tourelle. Un bloquage règlable  est prévu pour éviter de remonter au dela des limites des objectifs forts. Mais c'est un peu frustrant avec les objectifs faibles pour lesquels on a un peu de marge! Et les images de qualité restent difficiles à obtenir avec des sujets mobiles! Ci dessous quelques prises d'une premiere séance d'essai avec des diatomées, un cilié  et un rotifère bdelloide prélevés sur une mousse d'eau douce dans un ruisseau ardèchoix, Fontinalis antipyretica.

Sur le fond de la boite avec contraste Hoffman trop poussé! Particules et bactéries apparaissent entre les diatomées et l'héliozoaire, mais avec une sorte d'ombrage déformant.		Un cilié avec l'objectif fort 40x. Le contraste d'Hoffman bien dosé permet un effet de relief mème ave les boites plastique qui dépolarisent (contrairement au CID ),   mais avec un rendu moins fin. (A voir toutefois avec une immobilisation par flash  à faire...)
Diatomées plus naturelles et moins agrandies (au 10x)  sur fond de la boite avec passage de cilié		Rotifère bdelloide (obj. 20x), très difficile à suivre  lorsqu'il est libre de ses mouvements ! La aussi le flash serait utile...

Mème au 10x, les images de feuilles de Fontinalis non aplaties entre lame et lamelle nécessitent le focus stacking. Mais le problème est l'absence de bougé entre les prises! Toutefois la construction de cet appareil inversé fait que juste la tourelle se déplace pour la mise au point, on peut donc espèrer! J'ai donc  testé le focus stacking sur cet inversé . Voici le premier test avec une pile de 10 images avec l'objectif 10x. C'est encourageant: le bougé du liquide n'a pas empèché l'empilement  et un héliozoaire qui n'est net que sur 2 images reste visible. La feuille de fontinale a des cellules de plusieurs plans nettes également de sa base à son sommet, mème si le nombre d'images est insuffisant pour l'ensemble car il manque des planss intermédiaires.

Le 2e WE suivant l'achat, j'ai entrepris des essais de bricolages! J'ai ajouté un vieux zeiss 2,5x comme optique faible pour complèter un 4e trou sur les 6 de la tourelle. J'ai aussi pu placer un adaptateur olympus pour observer des boites de pétri plastiques plus petites que les flacons et moins hautes. (diamètre 54mm et 57mm pour couvercle; 15mm de haut) Mais il faut de toute façon se limiter à un très fin film d'eau pour les observations avec des objectifs forts. J'ai réfléchi à la façon d'utiliser des condenseurs d'autres fabriquants. J'avais un condenseur LWD Olympus que j'ai pu monter car ses 2 parties vissantes pouvaient se placer de part et d'autre du support Nikon. (photo ci contre) J'ai ainsi accès au contraste de phase, mais les anneaux ne sont compatibles qu'avec certains objectifs dont je dispose. C'est le cas pour un 40x Olympus. utilisé pour les 2 images ci dessous , amibe et diatomées